大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于检测凋亡的方法的问题，于是小编就整理了4个相关介绍检测凋亡的方法的解答，让我们一起看看吧。
tunel法检测细胞凋亡呈什么颜色？
根据我所了解的信息，TUNEL法（Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling）是一种常用于检测细胞凋亡的实验方法。在TUNEL法中，使用一种称为TdT（Terminal deoxynucleotidyl Transferase）的酶，将具有亡端的DNA片段与荧光标记的dUTP（脱氧尿苷三磷酸）进行特异性连接。
在TUNEL实验中，当细胞发生凋亡时，DNA的末端会暴露出来，TdT酶会将荧光标记的dUTP与这些暴露的DNA末端连接起来。连接完成后，可以通过荧光显微镜观察到这些荧光标记的DNA片段。
一般情况下，使用TUNEL法检测细胞凋亡时，荧光标记的dUTP会被选择性地染色为绿色或红色，具体颜色取决于使用的荧光染料。因此，TUNEL阳性的细胞在显微镜下呈现出绿色或红色的荧光信号，这可以用来指示细胞发生了凋亡。
需要注意的是，TUNEL法只是检测细胞凋亡的一种方法之一，其他方法如Annexin V染色法和DNA染料（如DAPI）染色法也常被用于细胞凋亡的检测。每种方法都有其特定的染色方式和颜色显示方式，具体使用哪种方法取决于实验设计和研究需求。
如何观察细胞凋亡的形态？
形态学观察方法:
1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象.
2、丫啶橙（AO）染色,荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光.凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体.
3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死.如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞.此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助.
4、透射电镜观察：可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边集,常呈新月形,核膜皱褶,胞质紧实,细胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。
流式细胞仪细胞凋亡的结果怎么分析？
如果是实验的话可以用PI等专门染活细胞或死细胞的染料进行染色，再用荧光显微镜或者流式细胞仪测量，原理一般是细胞膜的渗透性（比如死细胞一般细胞膜很通透，PI就会透过进行染色，活细胞则不会）。还有其他的一些染料则是测细胞凋亡的标志物（比如caspase含量）。
如果是只能在显微镜下观察判断的话，对于贴壁的细胞可以观察它是否贴壁以及它的形态（比如凋亡会有起泡，blob），但是这种方法非常不准确。。
怎样利用PI单染色法进行流式细胞仪检测细胞凋亡？
一、基本原理
流式细胞仪检测细胞凋亡：PI单染色法其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等。
二、试剂与仪器
1、PBS溶液
2、PI染液：将PI溶于PBS（pH7.4）中，终浓度为100ug/ml。用棕色瓶4℃避光保存
3、70%乙醇
4、400目筛网
5、流式细胞仪
三、实验步骤
1、收集细胞{数目约（1~ 5）×106个/mL｝，500~ 1000 r/min离心5min，弃去培养液。
2、3ml PBS洗涤1次。
3、离心去PBS，加入冰预冷的70%的乙醇固定，4℃，1—2小时。
4、离心弃去固定液，3mlPBS重悬5min。
5、400目的筛网过滤1次，500—1000r/min离心5min，弃去PBS。
6、用1ml PI染液染色，4℃避光30min。
7、流式细胞仪检测：PI用氩离子激发荧光，激光光波波长为488nm，发射光波波长大于630nm，产生红色荧光分析PI荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。
8、结果判断：在前散射光对侧散射光的散点图或地形图上，凋亡细胞与正常细胞相比，前散射光降低，而侧散射光可高可低，与细胞的类型有关;在分析PI荧光的直方图时，先用门技术排除成双或聚集的细胞以及发微弱荧光的细胞碎片，在PI荧光的直方图上，凋亡细胞在G1/G0期前出现一亚二倍体峰。如以G1/G0期所在位置的荧光强度为1.0，则一个典型的凋亡细胞样本其亚二倍体峰的荧光强度为0.45，可用鸡和鲑鱼的红细胞的PI荧光强度做参照标准，两者分别为0.35和0.7，可以确保在两者之间的不是细胞碎片而是完整的细胞。
四、注意事项
细胞凋亡时，其DNA可染性降低被认为是凋亡细胞的标志之一，但这种DNA可染性降低也可能是因为DNA含量的降低，或者是因为DNA结构的改变使其与染料结合的能力发生改变所致。在分析结果时应该注意。
到此，以上就是小编对于检测凋亡的方法的问题就介绍到这了，希望介绍关于检测凋亡的方法的4点解答对大家有用。
