流式细胞术检测,流式细胞术检测细胞凋亡

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  • 2024-09-09 17:10:18

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于流式细胞术检测的问题,于是小编就整理了4个相关介绍流式细胞术检测的解答,让我们一起看看吧。

流式报告是什么意思?

临床常说的“流式”是流式细胞术(flow cytometry)的简称,因其检测在液体中移动的细胞或粒子而得名。

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具体来说,单个细胞悬液中加入一个或多个荧光标记的抗体,抗体通过抗原抗体反应与细胞上的抗原结合。在流式细胞仪中,细胞在鞘液中单个流动,就像红细胞单个通过毛细血管一样通过检测口,仪器发出一个或多个激光束激发标记在细胞上的荧光物质。从荧光物质发出的光被收集、分离、检测,其数据被传输到控制流式细胞仪的计算机供分析。

流式细胞仪检测的原理?

流式细胞仪检测是利用细胞对激光的反射和散射以及荧光染料的发射来识别和分析细胞的一种技术方法。
其原理是将单个细胞通过喷嘴形成单个细胞液滴,液滴在激光束的照射下,细胞内染料吸收激光光源能激发荧光反应,荧光信号经过光电转换器转化为电信号后被传回电子计算机进行信号处理,利用参数分析仪将各项参数初步加工处理,最终通过比较筛选出目标细胞种群。
流式细胞仪检测作为一种高效、快速、准确的细胞分析方法,可以在短时间内对细胞进行定量和定性分析,广泛应用于医学、生物学、免疫学、遗传学等领域。

什么是流式细胞分析?

流式细胞分析是一种利用流式细胞仪对细胞进行自动分析和分选的现代技术。它集激光技术、流体力学、电子技术、计算机技术、荧光标记技术、单克隆抗体技术、细胞免疫学于一体,能够对细胞或微粒的物理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测。

根据不同的标记,流式细胞分析可以用于对细胞进行分类,并可以进行多参数检测的分析。

流式细胞仪原理?

流式细胞仪的工作原理是:将待测细胞经特异性荧光染料染色后放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接受方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。

这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过模/数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理,将分析结果显示在计算机屏幕上,也可以打印出来,还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。

检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达,其X轴为测量强度,Y轴为细胞数目。一般来说,流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数,这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据,既可以单独显示每个参数的直方图,也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。

细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频电晶体,充电后振动,使喷出的液流断裂为均匀的液滴,待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷,当液滴流经带有几千伏特的偏转板时,在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中,不予充电的液滴落入中间的废液容器,从而实现细胞的分离。对分选出的细胞可以进行培养或其它处理,做更深的研究。

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