激光共聚焦显微镜样品制备,激光共聚焦显微镜样品制备方法

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  • 2024-07-25 05:10:05

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于激光共聚焦显微镜样品制备的问题,于是小编就整理了4个相关介绍激光共聚焦显微镜样品制备的解答,让我们一起看看吧。

激光共聚焦显微镜原理?

激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,采用激光束作光源,激光束经照明针孔,经由分光镜反射至物镜,并聚焦于样品上,对标本焦平面上每一点进行扫描

激光共聚焦显微镜样品制备,激光共聚焦显微镜样品制备方法

组织样品中如果有可被激发的荧光物质,受到激发后发出的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜,通过探测针孔时先聚焦,聚焦后的光被光电倍增管(PMT)探测收集,并将信号输送到计算机,处理后在计算机显示器上显示图像。

在这个光路中,只有在焦平面的光才能穿过探测针孔,焦平面以外区域射来的光线在探测小孔平面是离焦的,不能通过小孔。因此,非观察点的背景呈黑色,反差增加,成像清晰。由于照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔与探测针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,即共聚焦。 以激光作光源并对样品进行扫描,在此过程中两次聚焦,故称为激光扫描共聚焦显微镜。

激光共聚焦显微镜、扫描电镜原子力显微镜三者的区别?

三者都是点源逐点扫描成像,通过控制扫描驱动范围,调节放大倍数,主要区别

1、极限分辨率不同, 缘于放大信号源的差异

激光共聚焦:极限分辨率 150nm.

扫描电镜:20nm~0.8nm.

原子力显微镜:极限分辨率0.1nm

2、扫描驱动方式不同

激光共聚焦:激光转镜控制激光扫描范围和扫描速度。

扫描电镜:电磁线圈控制电子束扫描范围和扫描速度,

原子力显微镜:压电位移传感器驱动样品台X,Y 方向扫描,

3、立体成像的差别

激光共聚焦:通过纳米精度步进电机驱动样品在Z轴方向逐层成像,软件将设定的各层图像合成清晰立体图像。

扫描电镜: 单帧图像具有很大景深,但属于二维图像,通过立体对技术可实现三维成像。

原子力显微镜:成像的本质就是测量表面每个像素点的高低,描绘出立体形貌。

4、工作环境差别

激光共聚焦和原子力显微镜可以在大气环境中进行测试样品

一般扫描电镜必须在高真空环境下进行测试样品

5、应用范围差别

激光共聚焦:几倍 ~ 几千倍,样品制备简单

扫描电镜 :几倍~几十万倍,样品制备稍微复杂一些,但总体也很简单。

原子力显微镜:几万倍~几千万倍, 要求样品非常平坦,样品制备很难。

6、价格

激光怎样做出显微镜?

要制作激光显微镜,首先需要一个激光源,通常使用氦氖激光器。激光通过透镜聚焦成一个细小的光点,然后通过物镜透镜照射到样品上。样品反射或散射的光经过物镜透镜再次聚焦,然后通过目镜透镜进入观察者的眼睛。为了提高分辨率,可以使用干涉仪或荧光标记技术。此外,还需要一个移动平台和控制系统来调整焦距和样品位置。激光显微镜广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域的高分辨率显微观察。

sted共聚焦扫描显微镜的用途?

Sted超高分辨激光共聚焦显微镜是一种用于生物学领域的医学科研仪器,于2017年7月7日启用。

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到此,以上就是小编对于激光共聚焦显微镜样品制备的问题就介绍到这了,希望介绍关于激光共聚焦显微镜样品制备的4点解答对大家有用。

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